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Alors qu'il travaille à la mise en place d'une nouvelle technologie surpuissante, un scientifique renommé disparaît dans des conditions des plus énigmatiques... Pour élucider le mystère, Jerry envoie ses meilleurs espions, les Totally Spies, évidemment ! C'est ainsi que Sam, Alex et Clover se retrouvent au Moyen-Age à la poursuite d'un dangereux cavalier masqué bien résolu à modifier le présent en agissant dans le passé.
Retrouveront-elles le scientifique ? Parviendront-elles à déjouer ses plans diaboliques ? Arriveront-elles à temps au concours de déguisements d'Halloween organisé par le lycée de Berverly Hills ?